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本方法適用于配合飼料、濃縮飼料、復合預混料飼料、維生素預混合飼料維生素A及維生素D、維生素E的測定。參考標準
1、方法原理
維生素預混料中的維生素A乙酸酯、維生素D3、維生素E（dl-α-生育酚乙酸酯）用甲醇溶液提取，試液注入液相色譜柱，用紫外檢測器在275 nm處測定，外標法計算維生素A、維生素D3、維生素E（dl-α-生育酚乙酸酯）含量。
2、主要儀器設備
1)液相色譜儀L210，帶紫外檢測器（上海儀電分析儀器有限公司）；
2波水??；
3)電子天平；
4)真空抽濾裝置。
3、實(shí)驗方法
1、混合標樣配置
維生素A乙酸酯、維生素D3、維生素E標準貯備液：準確稱(chēng)取維生素A乙酸酯、維生素D3、維生素E)各10.0 mg，置于100 mL棕色容量瓶中，用甲醇溶解并稀釋到刻度，混勻，4℃下保存。該貯備液濃度為0.1 mg/mL。
維生素A乙酸酯、維生素D3、維生素E（混合標準工作液：準確吸取各標準貯備液若干毫升于10 mL棕色容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，混勻。
2、試樣溶液的制備
稱(chēng)取試樣1.00 g置于100 mL棕色容量瓶中，加入約80 mL甲醇，于 65 ℃波水浴中提取30 min，冷卻至室溫，用甲醇稀釋至刻度，充分搖勻后過(guò)0.45 μm濾膜過(guò)濾。將試樣溶液進(jìn)一步稀釋至合適濃度，用于實(shí)驗分析。
3、液相色譜儀參考條件
色譜柱：C18 4.6 mm(i.d)×150mm；
流動(dòng)相：95%甲醇
流速：1 mL/min；
柱溫：室溫
波長(cháng)：275 nm；
測定：取相同體積試樣制備液和標準使用液分別注入相色譜儀，根據保留時(shí)間按定性，外標峰面積法定量。
4、實(shí)驗結果
1.維生素A乙酸酯 2.維生素D3 3.維生素E
4.2工作曲線(xiàn)的繪制
維生素A乙酸酯工作曲線(xiàn)見(jiàn)下圖，線(xiàn)性相關(guān)系數：0.9998
維生素D3工作曲線(xiàn)見(jiàn)下圖，線(xiàn)性相關(guān)系數：0.9998
維生素E工作曲線(xiàn)見(jiàn)下圖，線(xiàn)性相關(guān)系數：0.9992
4.3預混料實(shí)際樣品色譜圖
